Una nueva publicación en Clinical Infectious Diseases describe cómo complementar las pruebas de ARN convencionales con pruebas de anticuerpos podría mejorar nuestra capacidad para detectar el virus. En su artículo, Zhao et al. proporciona evidencia que la seroconversión, o el desarrollo de anticuerpos, que sufren los pacientes con COVID-19 brinda la oportunidad de mejorar la sensibilidad de las pruebas y evitar los casos faltantes de COVID-19. Los autores muestran que la naturaleza de esta seroconversión facilita la identificación de las personas que actualmente padecen una infección viral, así como de aquellas que pudieron haberse infectado semanas antes. Esta combinación de capacidades podría disminuir el impacto de la enfermedad al mejorar el manejo del paciente, así como los esfuerzos para controlar la propagación.
Para su estudio, los investigadores inscribieron a 173 de los 368 pacientes (Tabla 1) que habían ingresado en el Shenzhen Third People’s Hospital antes del 9 de febrero de este año y que habían dado positivo por SARS-CoV-2 en base a la transcriptasa inversa en tiempo real PCR (rRT-PCR) realizada en muestras del tracto respiratorio.
Tabla 1 | Características demográficas y clínicas de los pacientes y muestra de cohorte con COVID-19 en este estudio.
Notas: Los datos se presentan como medianas (rangos intercuartiles, IQR) yn (%). TS, hisopos de garganta; NS, hisopos nasales. * La otra enfermedad incluyó infección crónica por hepatitis B (n = 5), tumores (n = 2), síndrome de apnea obstructiva del sueño (n = 1), bronquitis crónica (n = 1), hiperlipidemia (n = 1), insuficiencia renal ( n = 1), tuberculosis (curada, n = 1) y enfermedad del hígado graso (n = 1). † Los datos indicaron el tiempo de confirmación de positivo para la infección 2019-nCoV mediante el uso de rRT-PCR en la muestra respiratoria desde el inicio de la enfermedad. ‡ Los datos indicaron el tiempo transcurrido desde el inicio de la enfermedad de la primera muestra de plasma de pacientes involucrados para la prueba serológica en este estudio.
Los científicos analizaron el plasma de estos pacientes para determinar el anticuerpo total (Ac), el anticuerpo de inmunoglobulina M (IgM) y el anticuerpo de inmunoglobulina G (IgG) contra el SARS-CoV-2 con kits de inmunoensayo enzimáticos(ELISA). Algunos de sus hallazgos críticos son los siguientes:
Cuando se analizaron aproximadamente 1 mes después del inicio de la enfermedad, todos los pacientes con COVID-19 tenían anticuerpos detectables
Con respecto a Ac e IgM, la seroconversión finalmente ocurrió en todos los pacientes cuyas muestras se analizaron durante al menos un mes después de la aparición de la enfermedad. En general, el Ac se volvió detectable primero, seguido del IgM y luego el IgG (Figura 1). El tiempo medio para la seroconversión fue de 11, 12 y 14 días, respectivamente.
Hubo 12 pacientes en el estudio para quienes las muestras sólo estaban disponibles desde la etapa inicial de la enfermedad, hasta 10 a 13 días después del inicio. Aunque estas primeras muestras fueron seronegativas, estos resultados no son inconsistentes con la noción de que se desarrollan anticuerpos en todos los pacientes dentro de un mes. Incluso en el caso de que los anticuerpos contra el SARS-Co-V-2 no pudieran haberse detectado en las muestras de estos pacientes un mes después del inicio de la enfermedad, la tasa de seroconversión para Ab seguiría siendo superior al 93%, y la tasa de seroconversión de IgM excedería el 82% (Tabla 1).
La prueba de anticuerpos puede detectar mejor infecciones previas para identificar el SARS-Co-V-2 en ciertos puntos de tiempo
A diferencia de la prueba de ARN, la prueba de anticuerpos alcanza una sensibilidad mayor cuando pasan más de 15 días de haber ocurrido la infección.
Tabla 2 | Realización de diferentes detecciones en muestras en diferentes momentos desde el inicio de los pacientes.
Tabla 3 | Presencia serológica de anticuerpos contra el SARS-CoV-2 en pacientes con ARN viral indetectable en diferentes momentos desde el inicio de la enfermedad.
* El ARN se probó utilizando una muestra de hisopo nasal / garganta.
La capacidad de la prueba de anticuerpos para señalar un diagnóstico de COVID-19 en resultados falsos negativos del ARN aumentó al 53,6% cuando las muestras se recolectaron entre los días 4 y 7 (Tabla 3). Estos resultados sugieren que incluso en la primera semana de inicio de la enfermedad, cuando la prueba de ARN es superior, identificando el 66.7% de los casos de COVID-19, en comparación con sólo el 38.3% con la prueba de anticuerpos (Tabla 2), podría ser un número significativo de falsos negativos evitado mediante la incorporación de pruebas de anticuerpos en los procedimientos de diagnóstico.
Aunque la prueba de anticuerpos puede identificar a los pacientes con COVID-19 que resultaron negativos con la prueba de ARN durante la etapa temprana de la infección, los resultados que produce durante los puntos de tiempo posteriores pueden proporcionar un caso aún más convincente para el uso de la prueba de anticuerpos en la prueba de COVID- 19 crisis. De 15 a 39 días después del inicio de la enfermedad, cuando la sensibilidad a los anticuerpos alcanzó su punto máximo, alcanzando el 100% para Ac e IgM, el ARN se pudo detectar en solo el 45.5% de las muestras y en aquellos que dieron negativo para COVID-19 usando la prueba de ARN durante este intervalo , El 100% tenía Ab detectable (Tabla 3). Incluso aquellos que dieron negativo usando la prueba de ARN entre los días 8 y 14 después del inicio de la enfermedad dieron positivo usando la prueba de anticuerpos en el 98.2% de los casos. Dado que las pruebas de ARN y las pruebas de anticuerpos mostraron una sensibilidad superior en distintos momentos, los autores argumentan que combinar estas técnicas mejorará nuestra capacidad para diagnosticar COVID-19.
Total antibody levels were associated with COVID-19 case severity
Datos de este estudio mostraron que el aumento de los niveles de anticuerpos no siempre se asoció con la eliminación de ARN (Figura 3), lo que sugiere que la seroconversión no libró eficazmente a los pacientes de COVID-19 del virus en todos los casos. En cambio, puede ser el caso con COVID-19 que los anticuerpos continúen aumentando en aquellos para quienes los niveles más bajos de anticuerpos no han permitido la recuperación. Si bien no se observaron diferencias significativas en los niveles de Ac en pacientes críticos versus no críticos en los primeros 12 días después del inicio de la enfermedad, los datos mostraron que los pacientes críticos tenían niveles más altos de Ac después del día 12 que los pacientes no críticos (Figura 4). Estos hallazgos sugieren que, además de la edad avanzada y el sexo masculino, los niveles más altos de Ac también pueden proporcionar un valor predictivo para clasificar la gravedad clínica de los casos de COVID-19 (Tabla 4).
Tabla 4 | Tabla 4 | Análisis univariado y multivariado de factores asociados con pacientes críticos.
notas: el valor p <0.05 indica diferencias significativas entre pacientes críticos y no críticos según lo determinado por el análisis del modelo GEE.
Conclusiones
Más investigación sobre la seroconversión que ocurre en aquellos con COVID-19 y datos comparativos adicionales sobre la sensibilidad de las pruebas de ARN y las pruebas de anticuerpos para identificar el virus ayudarán a dilucidar las mejores formas en que estas pruebas se pueden usar solas o en combinación para diagnosticar COVID -19 y mitigar su impacto en la humanidad.
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Referencias
Artículo Original: https://www.confirmbiosciences.com/covid-19-resources/case-broadening-pcr-molecular-antibody-testing-covid-19/
- Calfas, J, Ping, CH y Hinshaw D. El número total de muertos por coronavirus pasa de 78,000 a medida que se cierran algunos bloqueos. Wall Street Journal. https://www.wsj.com/articles/global-coronavirus-death-toll-nears-75-000-as-lockdowns-tighten-11586254730. Publicado en 2020. Accedido el 7 de abril de 2020.
- Krumholz H. Si tiene síntomas de coronavirus, suponga que tiene la enfermedad, incluso si su prueba es negativa. New York Times. https://www.nytimes.com/2020/04/01/well/live/coronavirus-symptoms-tests-false-negative.html. Publicado en 2020. Accedido el 9 de abril de 2020.
- Hoja informativa para pacientes: panel de diagnóstico RT-PCT en tiempo real CDC-2019-nCOV. CENTROS PARA EL CONTROL Y LA PREVENCIÓN DE ENFERMEDADES. https://www.cdc.gov/coronavirus/2019-ncov/downloads/Factsheet-for-Patients-2019-nCoV.pdf. Publicado en 2020. Accedido el 9 de abril de 2020.
- Feng, H, Liu, Y, Lv, M y Zhong J. Informe de un caso de COVID-19 con prueba de RT-PCR falso negativo: necesidad de TC de tórax. Jpn J Radiol. 2020.
- Zhao J, Yuan Q, Wang H, et al. Respuestas de anticuerpos al SARS-CoV-2 en pacientes con nueva enfermedad por coronavirus 2019. Clin Infect Dis. Marzo de 2020. doi: 10.1093 / cid / ciaa344.
